OriFect Transfection Reagent是一種高效的陽離子聚合物轉染試劑。聚合物分支中帶正電荷的基團可以與帶負電荷的核酸相互作用,形成穩定的OriFect-核酸復合物,與細胞表面結合并通過非特異性內吞作用進入細胞。OriFect轉染試劑與脂質體轉染試劑相比具有以下優勢:(1)達到相同轉染效率時細胞毒性更低;(2)轉染前無需更換培養基;(3)轉染過程中無需使用Opti-MEM等特殊培養基,降低了實驗成本;(4)轉染操作簡單,重復性好。
安全低毒---細胞毒性低,細胞存活率高
操作簡便---一步完成,無需更換和額外準備培養基,節省時間
高效穩定---轉染效率高,重復性好
應用廣泛---適用于各種貼壁或懸浮細胞的瞬時或穩定轉染
性價比高---性能優越,價格便宜
保存于4℃,不可冷凍

圖A. OriFect與T公司L試劑用EGFP表達質粒分別轉染293T。
圖B. OriFect與T公司L試劑分別轉染siRNA的Western-blot 結果。
1. 本產品僅供科研使用。請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。
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下載
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問題 |
分析 |
解決方法 |
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轉染效率偏低 |
細胞本身狀態不佳 |
使用適度傳代且為對數生長期的細胞 |
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OriFect濃度太高,造成細胞毒性 |
降低OriFect的用量 |
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OriFect和DNA的比例未優化 |
預實驗,確定OriFect和DNA的比例 |
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轉染體系不對 |
設立陽性對照,如轉染GFP基因,檢驗轉染體系 |
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DNA質量低,有降解或含有內毒素 |
使用純化后且OD260/280≥1.8的DNA |
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OriFect和OriFect enhancer未稀釋 |
根據使用說明對轉染試劑稀釋后加入 |
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轉染復合物中含有血清 |
使用無血清培養基 |
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支原體污染 |
定期檢查細胞中是否有支原體污染 |
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轉染后細胞狀態差 |
轉染試劑用量偏多,造成細胞毒性 |
減少轉染試劑用量,更換為正常含血清培養基 |
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轉染時細胞匯合度偏低 |
使用對數生長期的細胞,轉染時細胞匯合度達60%-80% |
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DNA未純化,含有內毒素 |
使用純化后且OD260/280≥1.8 的DNA |
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細胞株對轉染試劑較敏感或轉染后培養時間過長 |
加入轉染復合物6-8 h后,及時更換培養基 |
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基因的產物毒性 |
驗證基因產物是否有毒 |
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轉染復合物加入培養基后分布不均,局部轉染復合物濃度過高,細胞毒性偏高 |
加入轉染復合物后,輕晃勻或輕用手指敲孔板一側使其分布均勻 |
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細胞狀態不佳。傳代次數太少,細胞未恢復正常狀態;或傳代次數過多,細胞老化 |
使用適度傳代的細胞,保證使用的細胞狀態正常;減少代次差異對實驗結果的影響 |
1. Li Y, Xu H, Ma Z, et al. Comprehensive cognition of yak (Bos grunniens) AIFM2 gene and its anti-ferroptosis role in bisphenol A-induced fetal fibroblast model[J]. Animal Biotechnology, 2024, 35(1): 2377209
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